目次 / p1
緒言 / p4
第1章 酵母カルシニューリンの生化学的解析 / p7
　第1節 材料と方法 / p8
　　1-1 使用菌株 / p8
　　1-2 使用培地 / p8
　　1-3 DNA操作 / p9
　　1-4 融合タンパク質の発現及び精製 / p9
　　1-5 抗体の作製 / p12
　　1-6 タンパク質解析一般 / p13
　　1-7 カルシニューリン(CN)の活性測定 / p15
　第2節 抗Cmp2抗体の作製 / p17
　　2-1 はじめに / p17
　　2-2 β-ガラクトシダーゼ-Cmp2融合タンパク質発現用プラスミドの構築 / p17
　　2-3 融合タンパク質の発現及び精製 / p18
　　2-4 抗Cmp2抗体の作製 / p18
　第3節 酵母カルシニューリン(CN)の部分精製 / p18
　　3-1 はじめに / p18
　　3-2 CMP2遺伝子産物(Cmp2)の同定 / p18
　　3-3 酵母CNの精製条件の検討 / p18
　　3-4 酵母CNの部分精製 / p19
　　3-5 活性測定 / p20
　　3-6 CMP1,CMP2はCNをコードするか｡ / p21
　　3-7 CMP1,CMP2以外のCN遺伝子は存在するか｡ / p22
　第4節 考察 / p23
第2章 CNによる細胞内Na⁺濃度調節機構の解析 / p25
　第5節 材料と方法 / p26
　　5-1 使用菌株 / p26
　　5-2 使用培地 / p27
　　5-3 イオン濃度測定用サンプルの調製 / p27
　　5-4 酵母Na⁺の排出の測定 / p27
　　5-5 等速電気泳動装置によるイオン濃度の測定 / p27
　第6節 酵母細胞内のイオン濃度の測定及びCN遺伝子破壊の与える影響 / p29
　　6-1 はじめに / p29
　　6-2 細胞内Na⁺,K⁺濃度の測定 / p29
　　6-3 Na⁺排出の測定 / p30
　　6-4 K⁺の影響 / p31
　　6-5 FK506の影響 / p31
　第7節 考察 / p32
第3章 バナジン酸耐性に必要な遺伝子SVS1の解析 / p34
　第8節 材料と方法 / p35
　　8-1 使用菌株 / p35
　　8-2 使用培地 / p36
　　8-3 DNA操作 / p36
　第9節 SVS1遺伝子の取得と解析 / p38
　　9-1 はじめに / p38
　　9-2 SVS1遺伝子の取得 / p38
　　9-3 DNA塩基配列の決定 / p39
　　9-4 Svs1タンパクの予想アミノ酸配列上での解析 / p39
　　9-5 SVS1遺伝子の破壊 / p41
　　9-6 SVS1遺伝子の転写制御 / p42
　第10節 SVS1遺伝子産物の解析 / p42
　　10-1 はじめに / p42
　　10-2 抗Svs1抗体の作製 / p42
　　10-3 SVS1遺伝子産物の解析 / p43
　第11節 Svs1とCNの遺伝学的関係 / p43
　　11-1 はじめに / p43
　　11-2 CNはSVS1の転写を制御するか｡ / p43
　　11-3 SVS1はCNと同じ情報伝達系で働くか｡またその位置関係はどうか｡ / p44
　第12節 考察 / p45
第4章 CNとMAPキナーゼカスケードとの遺伝学的関係 / p46
　第13節 材料と方法 / p47
　　13-1 使用菌株 / p47
　　13-2 使用培地 / p47
　　13-3 DNA操作 / p48
　第14節 crv変異株の取得 / p49
　　14-1 はじめに / p49
　　14-2 crv変異株の取得 / p49
　　14-3 CRV2,CRV3遺伝子の取得 / p51
　第15節 CNとMAPキナーゼカスケードの遺伝学的解析 / p53
　　15-1 CN,MAPキナーゼカスケード二重欠損株の解析(I) / p53
　　15-2 CN,MAPキナーゼカスケードニ重欠損株の解析(II) / p54
　　15-3 CNはMAPキナーゼカスケードと共通のプロセスに関わるか｡ / p55
　　15-4 グルカン合成系との関わり / p56
　　15-5 α-factorによる停止からの復帰における両情報伝達系の関係 / p58
　第16節 考察 / p59
総括 / p62
参考文献 / p65
謝辞 / p70