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ID 23497
file
45-0283.pdf 905 KB
title alternative
Bacillus thuringiensis dendrolimus T84A1の殺虫性蛋白質遺伝子のクローニング
creator
Shibata, Jiro
Tamiya, Masakatsu
Nagamatsu, Yasunori
NDC
Biology
abstract
B. thuringiensis (Bt) dendrolimus T84A1のプラスミドから、殺虫性結晶蛋白質の遺伝子を大腸菌によってクローン化した。本菌は10.0, 19.3と51.1kbの3種のプラスミドを保有していた。PstI消化で生じた断片をベクターpBR322と連結して大腸菌を形質転換した。結晶蛋白質の抗体と反応し同じ分子量の蛋白質を生産する1株が得られた。これは10.22kbのBtDNAを含む組換えプラスミドをもち、欠失実験と毒素生産能分祈から5kbのHpaI-PstIに領域に遺伝子が認められた。ハイブリダイぜイション分析から、クローン化された遺伝子が最も大きいプラスミドに由来すること、本菌中唯一のものであること、その周辺に何らかの反復配列があることが明らかになった。本遺伝子部はsotto株のそれと類似していたが、5'-隣接部の変化が認められた。
abstract
Pst I -fragments from three plasmid DNAs (10.0, 19.3 and 51.1 kb) of Bacillus. thuringiensis (Bt) dendrolimus T84A1 were cloned in Escherichia coli. One of transformants, which carrys a 10.22 kb Bt DNA (9.91 and 0.31 kb Pst I -segments), produced a 145 k polypeptide which has the same electrophoretic mobility as the crystal protein (CP) and reacts with anti-CP antibodies. Deletion analysis revealed that the entire CP gene resided on the 5.0 Kb Hpa I -Pst I region within the 9.91 kb Pst I -segment. Hybridization analysis showed that the cloned gene was derived from the largest plasmid and might be the only one in this Bt strain. The restriction enzyme map of the cloned segment was very similar to it of the sotto strain except the 5' -adjacent region of the CP gene.
journal title
Journal of the Faculty of Applied Biological Science, Hiroshima University
volume
Volume 28
issue
Issue 1・2
start page
63
end page
69
date of issued
1989-11
publisher
広島大学生物生産学部
農林水産研究情報センター
issn
0387-7647
ncid
SelfDOI
language
eng
nii type
Departmental Bulletin Paper
HU type
Departmental Bulletin Papers
DCMI type
text
format
application/pdf
text version
publisher
department
Graduate School of Biosphere Science
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