A heteroduplex-preferential Tm depressor for the specificity-enhanced DNA polymerase chain reactions

Analytical Biochemistry 337 巻 1 号 154-160 頁 2005-02-01 発行
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ファイル情報(添付)
AnalBiochem_337_154.pdf 565 KB 種類 : 全文
タイトル ( eng )
A heteroduplex-preferential Tm depressor for the specificity-enhanced DNA polymerase chain reactions
作成者
Kinoshita-Kikuta Emiko
収録物名
Analytical Biochemistry
337
1
開始ページ 154
終了ページ 160
抄録
A macrocyclic tetraamine zinc(II) complex appended with two quinoline groups, Zn2+.1,7-bis(4-quinolylmethyl)-1,4,7,10-tetraazacyclododecane (Zn2+.Q2-cyclen), was successfully used as a novel additive to suppress non-specific products in DNA polymerase chain reaction (PCR). In the presence of Zn2+.Q2-cyclen, the Tm drop of 20-bp heteroduplexes containing a non-complementary base pair was greater than that of the corresponding homoduplex (i.e., primer DNA). Here, we applied such preferential DNA melting to a specificity-enhanced PCR using micromolar concentrations of Zn2+.Q2-cyclen. We demonstrated the selective amplification of target DNA fragments (i.e., the human heart sodium channel Nav1.5 gene) from genomic DNA or a cDNA library. The optimum condition for the specificity-enhanced PCR could be determined in the concentration range of 1.50 μM of Zn2+.Q2-cyclen.
著者キーワード
Macrocyclic tetraamine
Zinc(II) complex
Tm depressor
Specificity-enhanced PCR
NDC分類
生物科学・一般生物学 [ 460 ]
言語
英語
資源タイプ 学術雑誌論文
出版者
Elsevier
発行日 2005-02-01
権利情報
Copyright (c) 2004 Elsevier Ltd.
出版タイプ Author’s Original(十分な品質であるとして、著者から正式な査読に提出される版)
アクセス権 オープンアクセス
収録物識別子
[ISSN] 0003-2697
[DOI] 10.1016/j.ab.2004.10.009
[NCID] AA00524867
[PMID] 15649389
[DOI] http://dx.doi.org/10.1016/j.ab.2004.10.009 ~の異版である